N端Edman测序是用于确定蛋白质N端氨基酸序列的经典方法。自从Pehr Edman在1950年首次引入这一技术以来，它已经在蛋白质化学领域中占据了重要地位。通过这种方法，研究人员可以精确地识别和分析蛋白质的N端氨基酸序列，从而为蛋白质的功能研究和结构解析提供关键的信息。N端Edman测序的基本原理是利用Edman降解反应，该反应选择性地从多肽链的N端移除一个氨基酸，并将其转化为一种可检测的衍生物。通过反复进行这一过程，可以逐步确定多肽链的序列。N端Edman测序在蛋白质组学研究中还可以分析蛋白质加工和修饰过程中的变化，例如蛋白质的剪切、翻译后修饰等。而在病理学研究中，Edman测序应用于分析病理样本中的异常蛋白质，如检测淀粉样蛋白沉积物中的特定序列，以便诊断与治疗阿尔茨海默病等与蛋白质错误折叠相关的疾病。此外，在农业科学中，N端Edman测序用于分析植物抗病蛋白，以改良作物的抗病性。通过确定这些蛋白质的序列，研究者可以设计基因工程策略来增强作物对病害的抵抗能力。

一、N端Edman测序的技术流程

1、样品制备

（1）样品纯化：在进行N端Edman测序之前需要进行样品的纯化。蛋白质样品需要达到一定的纯度，以确保测序的准确性。常用的纯化方法包括凝胶电泳、液相色谱等。

（2）样品固定：纯化后的样品需要固定在固体支持物上。这一步骤可确保Edman降解过程中氨基酸的顺序释放。通常使用的固体支持物包括玻璃纤维、聚偏氟乙烯（PVDF）膜等。

（3）样品检测：在固定后，进行初步检测以确保样品的质量和浓度。这通常通过紫外吸收、染色等方法完成。

2、Edman降解反应

（1）化学反应：N端Edman测序的核心是Edman降解反应。在这一过程中，苯异硫氰酸酯（PITC）与多肽链的N端氨基酸反应，形成环状衍生物。

（2）衍生物分离：形成的衍生物从多肽链中释放出来，然后通过色谱法分离和检测。每一个循环释放一个氨基酸衍生物，并在后续步骤中进行识别。

（3）序列识别：通过高效液相色谱（HPLC）等技术，检测和识别每一个被释放的氨基酸衍生物，从而确定其序列信息。

二、N端Edman测序的优势与挑战

1、技术优势

（1）高精度：N端Edman测序能够提供精确的氨基酸序列信息，尤其适用于短肽和低丰度蛋白质的测序。

（2）特异性强：该技术能够特异性识别蛋白质的N端，因此在研究蛋白质的翻译起始位点和信号肽时尤为重要。

（3）无需复杂设备：与某些高通量技术相比，N端Edman测序的设备要求相对简单，适合于实验室的常规应用。

2、技术挑战

（1）序列长度限制：Edman降解法在N端测序时通常只能测定前10至50个氨基酸。随着序列长度增加，反应效率和准确性显著下降，导致测序困难。

（2）N端封闭影响：蛋白质或多肽N端若被修饰或封闭（如乙酰化），则Edman降解无法进行反应，测序将失败。这对许多天然存在的蛋白质样品构成显著限制。

百泰派克生物科技在N端Edman测序方面提供专业的服务，我们拥有经验丰富的科研团队和严谨的实验流程，致力于为客户提供高质量的蛋白质测序服务。无论是基础研究还是应用开发，我们都能够根据客户的具体需求，提供量身定制的解决方案，助力客户在蛋白质组学研究中取得突破。欢迎更多客户与我们合作，共同探索蛋白质科学的无限可能。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

>>点击了解更多优质服务项目