抗体测序是指对抗体（免疫球蛋白）的基因序列或氨基酸序列进行测定的过程。抗体是免疫系统用来识别和中和外来物质（如细菌和病毒）的关键蛋白质，因此全面了解抗体的序列信息对于开发新型疫苗、研制治疗性抗体药物以及深入了解免疫系统的工作原理至关重要。抗体测序的关键在于通过对抗体序列的精确分析，科学家们能够揭示出抗体特有的结合特性以及其在免疫应答中的作用。在科研领域，抗体测序用于发现和验证抗体的特异性和多样性。现代抗体测序技术可以揭示抗体重链和轻链的氨基酸序列，从而帮助研究人员理解抗体与抗原之间的特异性结合模式。这一信息能够开发有效结合病原体的治疗性抗体药物。此外，抗体测序还能帮助科学家追踪免疫应答中的抗体进化过程，从而为疫苗设计提供关键信息。在临床诊断中，抗体测序技术同样发挥作用。通过测序患者体内产生的抗体，医生能够获得有关感染状态或免疫系统异常的宝贵信息。例如，在自体免疫疾病研究中，通过抗体测序可以识别出错误攻击自身组织的抗体，这将有助于制定更有效的治疗策略。此外，抗体测序还被广泛应用于检测和分离用于治疗癌症和传染病的单克隆抗体，为个性化医疗提供支持。

一、基于核酸的抗体测序测序方法

1、Sanger 测序

传统方法，以双脱氧核苷酸终止法为原理。在 DNA 合成反应体系中加入少量带有放射性或荧光标记的双脱氧核苷酸，使其随机掺入到正在合成的 DNA 链中，导致链延伸终止，产生不同长度的 DNA 片段，经电泳分离和放射自显影或荧光检测，读取 DNA 序列。常用于单一克隆抗体的基因测序，准确性高，但通量低、成本高、操作繁琐。

2、高通量测序（NGS）

如 Illumina 测序技术，通过桥式 PCR 等技术将 DNA 片段固定在芯片上进行扩增，然后边合成边测序，可同时对大量 DNA 分子进行测序，大幅提高测序效率和覆盖度，能对大规模抗体库进行测序，获得大量抗体的基因序列信息，挖掘抗体多样性。

3、单细胞测序

对单个 B 细胞中的抗体基因进行测序，可解析单个细胞中的抗体基因和氨基酸序列，揭示抗体的个体多样性和克隆进化过程，有助于研究抗体在免疫应答和免疫记忆中的动态变化。

二、基于蛋白质的抗体测序方法

1、Edman 降解法

从抗体蛋白 N 端开始，用异硫氰酸苯酯与蛋白质的 N 端氨基酸反应，形成苯氨基硫甲酰衍生物，在酸性条件下，N 端氨基酸从肽链上断裂下来，经有机溶剂萃取后，用高效液相色谱（HPLC）根据每个氨基酸的洗脱时间确定氨基酸的种类，从而实现抗体蛋白测序。能准确测定 N 端的几十个氨基酸，但对于较长的抗体序列，操作复杂、效率低。

2、质谱法

利用串联质谱等方法，一级质谱获取高效液相色谱 MS1 中洗脱的肽的质荷比（m/z）和肽的强度，二级质谱选择单个肽段对其进行碎裂，得到该肽段的光谱数据，再通过与理论数据库比对的方式对样品进行序列分析。灵敏度高、速度快，可同时分析多种肽段，但对复杂混合物的分析可能存在挑战，需要高质量的数据库支持。

三、注意事项及常见问题

在抗体测序过程中，样本处理的质量直接影响测序的结果。因此，操作人员需要严格遵循标准化的操作流程，注意防止样本污染和降解。此外，在数据分析时，要合理选择分析工具和参数，以提高结果的准确性。抗体测序可能面临的挑战包括样本复杂性导致的测序难度、序列重叠问题以及序列拼接的困难等。为了克服这些问题，研究者需要结合多种技术手段，并不断优化测序策略。

抗体测序技术具有高通量、高准确度和高灵敏度的特点，使得研究人员能够在短时间内获得大量的抗体序列信息。这一技术不仅提高了抗体研究的效率，还大大降低了研究成本。百泰派克生物科技致力于提供世界一流的抗体测序服务，帮助研究人员和企业迅速获取高质量的抗体序列信息。我们的团队由经验丰富的科研人员组成，配备先进的技术平台，确保为客户提供精准、高效的测序解决方案。我们提供灵活的服务选项，能够满足从基础研究到临床应用的多种需求。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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