产品信息
 
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
Endpoint Chromogenic LAL Assays 终点显色鲎分析试剂盒
60402ES32
32T
1,866
60402ES58
80T
3,866
 
产品描述
 
鲎试剂（ Limulus amebocyte lysate, LAL）为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。
本试剂盒的检测原理是：在适宜的条件下（温度，pH值及无干扰物质），细菌内毒素激活C因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对**苯胺（pNA，λmax = 405 nm）。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。同时，对**苯胺（pNA）也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色（λmax = 545 nm），避免了供试品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。
按反应时间不同可检测0.1 EU/mL-1 EU/mL 和0.01 EU/mL -0.1 EU/mL 两个区间（反应时间T1和T2见出厂检验报告） 。
 
产品组分
 
组分编号
组分名称
产品编号/规格
60402ES32（32T）
60402ES58（80T）
60402-A
细菌内毒素工作标准品
2 支
5 支
60402-B
鲎试剂
1.7 mL×2
1.7 mL×5
60402-C
显色基质
1.7 mL×2
1.7 mL×5
60402-D
偶氮化试剂1
10 mL×2
10 mL×5
60402-E
偶氮化试剂2
10 mL×2
10 mL×5
60402-F
偶氮化试剂3
10 mL×2
10 mL×5
60402-G
细菌内毒素检查用水
50 mL×3
50 mL×4
60402-H
无热原配件（离心管/吸头）
10包
20包
 
运输与保存方法
 
冰袋运输。4 ºC，避光保存，有效期2年。
 
需准备的材料和设备注意事项

1）该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2）接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的， 玻璃器皿可经250℃干烤至少60 min去除热原。试验过程应防止微生物的污染。
3）当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验，参见供试品的干扰试验。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本品仅用于科研用途。
 
无热原试管、无热原吸头，浓盐酸。漩涡混合仪、移液器、多道移液器、封口膜、试管架。恒温水浴箱（37±1℃）、分光光度计。
 
供试品的贮存与预处理（若供试品为血液类，请参照我司配套血液相关处理试剂使用说明书）
 
1）供试品的pH值应在6-8之间，若超出此范围，需用无热原缓冲液、0.1 M氢氧化钠或0.1 M盐酸调节。
2）若供试品中可能存在鲎实验的干扰物质，处理参见供试品的干扰试验。
3）若供试品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖会产生G因子旁路反应，干扰内毒素检测），需选用特异性鲎试剂。
4）若供试品为一些抗菌素如头孢类抗菌素和磺胺制剂会对偶氮染色剂产生偶联反应而干扰偶氮化显色，需要选用不含偶氮化试剂的试剂盒（我公司提供）。
5）若供试品的本底吸光度值大于0.5，必须对供试品进行稀释后再检测。
6）若供试品颜色较深（例如溶血），或在酸性条件下颜色加深（例如一些组织培养介质），必须设置供试品空白管以扣除供试品自身的颜色本底。供试品空白管不加入鲎试剂，以等体积鲎试剂的溶剂（该处为细菌内毒素检查用水）代替。其余操作同供试品管。
 
操作方法
 
1.细菌内毒素标准溶液配制
1）溶解：取细菌内毒素工作品1支，加入1 mL细菌内毒素检查用水（BET水），置漩涡混匀器上混匀15 min，混匀时要防止液体溅出。
2）稀释：将细菌内毒素母液先用细菌内毒素检查用水稀释成1 EU/mL，再稀释成不同浓度的标准品工作液。 
A. 以10 EU/mL的内毒素标准品和0.5、0.25、0.125、0.0625 EU/mL的梯度为例说明：
在10 EU/支的工作标准品中加入1 mL BET水，则标准品浓度为10 EU/mL。取0.2 mL 10 EU/mL的标准品，加入1.8 mL BET水， 终浓度为1.0 EU/mL。以此为母液按下表稀释成等比例浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4 h内用完。
注：每步稀释均需在漩涡混匀器上混匀30 sec。
表1 内毒素标准溶液配制
内毒素浓度(EU/mL)
1
0.5
0.25
0.125
0.0625