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使用最广泛的由碱性磷酸酶催化的ELISA底物为PNPP。PNPP生成黄色水溶性反应产物，且该产物在405nm有光吸收。粉末或一次性使用片剂包装的PNPP需要溶于二乙醇胺缓冲液。稳定的PNPP溶液使用方便且重复性好。

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CNP-AFU）被样本中的α-L-岩藻糖苷酶作用水解产生CNP或者M-G-CNP-AFU被样本中的α-L-岩藻糖苷酶的作用，水解产生MG和 CNP。测定CNP的吸光度的增加量即可以得到AFU的活性。

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